腺苷脫氨酶臨床診斷試劑盒 型號(hào):160ml
腺苷脫氨酶臨床診斷試劑盒使用說明書
（酶法連續(xù)監(jiān)測(cè)法、液體二試劑）
用 途：
本試劑盒適用于體外定量測(cè)定人血清、血漿、胸腹水或腦脊液中的腺苷脫氨酶（ADA）活性。
臨床意義：
肝臟病—ADA活性是反映肝損傷的敏感指標(biāo)，可作為肝功能常規(guī)檢查項(xiàng)目之一，與ALT或GGT（r-GT）等組成肝酶譜能較全面地反映肝臟病的酶學(xué)改變。
血清中ADA活性的測(cè)定可①用于判斷急性肝損傷及殘留病變② 協(xié)助診斷慢性肝病③ 有助于肝纖維的診斷④ 有助于黃疸的鑒別
腺苷脫氨酶（ADA）在良惡性難辨的滲出液鑒別診斷上有重要價(jià)值。結(jié)核性胸腹水ADA活性顯著增高，癌性胸腹水不增高。此外，腦脊液ADA檢測(cè)可作為中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病診斷和鑒別診斷的重要指標(biāo)，結(jié)核性腦膜炎ADA活性顯著增高，病毒性腦炎不增高，顱內(nèi)腫瘤及中樞神經(jīng)系統(tǒng)白血病稍增高。
原 理：
本方法原理反應(yīng)方程式如下：
Adenosine + H2O ADA Inosine + NH4
NH4 + 2-Ketoglutarate + NADPH GLDH Glutamate + NADP + H2O
應(yīng)用腺苷脫氨酶偶聯(lián)谷氨酸脫氫酶反應(yīng)連續(xù)監(jiān)測(cè)法。腺苷脫氨酶酶解腺苷反應(yīng)產(chǎn)生氨，再通過偶聯(lián)谷氨酸脫氫酶的作用，氧化NADPH成為NADP，從而得以測(cè)定NADPH在340 nm處吸光度下降的速度，通過測(cè)量340nm處吸光度下降的速度，可以測(cè)算腺苷脫氨酶的活性大小。
試劑組成：
試劑Ⅰ NADPH 0.2 mmol/L
α-Ketoglutarate 15 mmo1/L
Glutamate Dehydrogenase 50000 U/L
試劑Ⅱ Adenosine 10 mmo1/L
試劑配制：
本試劑盒為液體雙試劑，可直接上機(jī)使用。
如果受限于分析儀只能接受單試劑，則可以在測(cè)試前依比例（詳見試驗(yàn)參數(shù)）混合試劑Ⅰ及試劑Ⅱ成為一混合劑。
試劑的穩(wěn)定與貯存期：
自生產(chǎn)日期起，避光保存2-8℃可穩(wěn)定一年。室溫（20℃）至少穩(wěn)定12小時(shí)。
樣品要求：
血清、胸腹水或腦脊液。如果有需要可以進(jìn)行抗凝處理。
試驗(yàn)參數(shù)與操作步驟：
溫度 37 ℃
波長(zhǎng) 340 nm （主）& 450 nm （副）
比色杯光徑 1.0 cm
測(cè)試方法 速率法
反應(yīng)方向 負(fù)
予孵育 0.02 ml樣品 + 0.2 ml試劑Ⅰ（或依比例混勻）
予孵育時(shí)間 5 分鐘
啟動(dòng)反應(yīng) 加0.05 ml試劑II （或依比例混勻）
延遲時(shí)間 1 分鐘
測(cè)試時(shí)間 1.5 分鐘
計(jì)算測(cè)試時(shí)間段每分鐘平均吸光度的變化(△A/min)。
K值 -2170
計(jì) 算：
△A/min×Tv×1000
ADA (U/L) =
ε×Sv×L
ε: 毫摩爾消光系數(shù) NADPH = 6.22
Tv: 總反應(yīng)體積(ml)
Sv: 樣品體積(ml)
L : 比色杯光徑(cm)
注意事項(xiàng)：
1.試劑和樣品用量可因儀器不同，按比例增減。
2. 若反應(yīng)吸光值變化大于0.20 A/min，須用生理鹽水稀釋樣品，結(jié)果乘以稀釋倍數(shù)。
3.如保存不當(dāng)，試劑發(fā)現(xiàn)有混濁或吸光度在340 nm處 < 0.5 時(shí)，應(yīng)棄用。
試劑性能：
線性范圍: 0―600 U/L
靈敏度: 每分鐘0.00046的光吸收值變化大約相當(dāng)于1 U/L 準(zhǔn)確度: 測(cè)定定值質(zhì)量控制血清，測(cè)定值在定值±5%的范圍以內(nèi).
精密度: CV ≤ 3%
參 考 值：
5~15U/L，各實(shí)驗(yàn)室需要自行訂定預(yù)期參考值
儀 器：
全自動(dòng)、半自動(dòng)生化分析儀或可見光分光光度計(jì)
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